<div dir="ltr">Hey<div><br></div><div>I was rushing around over the weekend trying to keep electrocompetent cells cold when prepping them, and ended up just getting a whole lot of arcing (which is pretty scary, there is a large flash and pop, with the electroporation cassette is for the most part destroyed).</div><div><br></div><div>Room temperature prep would be nice, so I was going to test that this week, but I decided to do some investigating. Apparently, electrocompetent cells can be prepared at room temperature- <a href="http://www.nature.com/articles/srep24648">http://www.nature.com/articles/srep24648</a></div><div><br></div><div>The reason why (hypothetically) is explained pretty well here- <a href="https://www.reddit.com/r/askscience/comments/33n3w9/why_do_we_need_to_keep_competent_cells_on_ice/">https://www.reddit.com/r/askscience/comments/33n3w9/why_do_we_need_to_keep_competent_cells_on_ice/</a></div><div><br></div><div>Essentially, the hypothesis is that the cold makes lipids in the membrane seal slower. When doing heat shock, which is pretty slow, this is likely helpful.</div><div><br></div><div>They propose in the nature paper that ice-cold temperatures change the membrane topology and survivability. Since the mechanism of competence is the electric field, (while with heat-shock it appears to be ions and temperature) which is applied quickly and sometimes lethally, the slow-down that cold provides likely doesn't outweigh the survivability costs, as more healthy cells will survive electroporation. </div><div><br></div><div><br></div><div><br></div><div>Overall, if you are making your own electrocompetent cells, perhaps try to do it at room temperature instead of rushing around with ice. I know that's wayyyyy easier for me in a DIY setting.</div><div><br></div><div>-Keoni</div></div>