<div dir="ltr">What type of water were you using.  I would make sure to use distilled water or better and not tap water.  </div><div class="gmail_extra"><br><div class="gmail_quote">On Mon, Jun 27, 2016 at 5:21 PM, Keoni Gandall <span dir="ltr"><<a href="mailto:koeng101@gmail.com" target="_blank">koeng101@gmail.com</a>></span> wrote:<br><blockquote class="gmail_quote" style="margin:0 0 0 .8ex;border-left:1px #ccc solid;padding-left:1ex"><div dir="ltr">Hey<div><br></div><div>I was rushing around over the weekend trying to keep electrocompetent cells cold when prepping them, and ended up just getting a whole lot of arcing (which is pretty scary, there is a large flash and pop, with the electroporation cassette is for the most part destroyed).</div><div><br></div><div>Room temperature prep would be nice, so I was going to test that this week, but I decided to do some investigating. Apparently, electrocompetent cells can be prepared at room temperature- <a href="http://www.nature.com/articles/srep24648" target="_blank">http://www.nature.com/articles/srep24648</a></div><div><br></div><div>The reason why (hypothetically) is explained pretty well here- <a href="https://www.reddit.com/r/askscience/comments/33n3w9/why_do_we_need_to_keep_competent_cells_on_ice/" target="_blank">https://www.reddit.com/r/askscience/comments/33n3w9/why_do_we_need_to_keep_competent_cells_on_ice/</a></div><div><br></div><div>Essentially, the hypothesis is that the cold makes lipids in the membrane seal slower. When doing heat shock, which is pretty slow, this is likely helpful.</div><div><br></div><div>They propose in the nature paper that ice-cold temperatures change the membrane topology and survivability. Since the mechanism of competence is the electric field, (while with heat-shock it appears to be ions and temperature) which is applied quickly and sometimes lethally, the slow-down that cold provides likely doesn't outweigh the survivability costs, as more healthy cells will survive electroporation. </div><div><br></div><div><br></div><div><br></div><div>Overall, if you are making your own electrocompetent cells, perhaps try to do it at room temperature instead of rushing around with ice. I know that's wayyyyy easier for me in a DIY setting.</div><span class="HOEnZb"><font color="#888888"><div><br></div><div>-Keoni</div></font></span></div>
<br>_______________________________________________<br>
open_electroporator mailing list<br>
<a href="mailto:open_electroporator@cibolo.us">open_electroporator@cibolo.us</a><br>
<a href="https://cibolo.us/mailman/listinfo/open_electroporator" rel="noreferrer" target="_blank">https://cibolo.us/mailman/listinfo/open_electroporator</a><br>
<br></blockquote></div><br></div>